高效液相色譜柱異常排除
當(dāng)高效液相色譜(HPLC)柱出現(xiàn)異常時(shí),可以采取以下步驟進(jìn)行排除:
1. 檢查壓力是否正常:如果壓力異常,需要檢查泵是否正常工作,包括泵的流量設(shè)置、泵頭密封圈是否完好等。同時(shí),檢查連接管路是否有堵塞、漏液等情況。
2. 檢查流動(dòng)相是否正確:流動(dòng)相使用不當(dāng)或緩沖鹽的結(jié)晶沉淀也可能導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)。需要確保流動(dòng)相的正確配比和PH值調(diào)節(jié),以避免對(duì)色譜柱產(chǎn)生不必要的損害。
3. 檢查色譜柱是否平衡:每次運(yùn)行前要給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱,以避免因色譜柱未平衡而導(dǎo)致的雙峰現(xiàn)象。
4. 檢查流速是否穩(wěn)定:流速的變化也可能導(dǎo)致保留時(shí)間漂移和雙峰出現(xiàn)。需要確保輸液泵流速穩(wěn)定,以避免對(duì)色譜圖產(chǎn)生影響。
5. 檢查進(jìn)樣過(guò)程是否正常:進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣或樣品組分的吸收低于流動(dòng)相,都可能導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)。需要確保在進(jìn)樣過(guò)程中避免空氣進(jìn)入,并選擇合適的樣品組分吸收波長(zhǎng)。
6. 檢查溫度控制是否適宜:溫控不當(dāng)可能會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間漂移和雙峰出現(xiàn)。需要確保柱溫箱溫度恒定,以避免對(duì)色譜柱產(chǎn)生影響。
7. 檢查過(guò)濾器是否堵塞:如果流動(dòng)相或溶劑中存在雜質(zhì),可能會(huì)導(dǎo)致過(guò)濾器堵塞,從而影響流動(dòng)相的流速和色譜圖的穩(wěn)定性。需要定期更換過(guò)濾器芯,并使用過(guò)濾后的流動(dòng)相。
8. 檢查單向閥是否損壞:?jiǎn)蜗蜷y損壞可能導(dǎo)致液相色譜出現(xiàn)雙峰。需要更換損壞的單向閥。
總之,當(dāng)高效液相色譜柱出現(xiàn)異常時(shí),需要從多方面進(jìn)行檢查和排除,以確保液相色譜的正常運(yùn)行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。