在堿性流動(dòng)相中進(jìn)行反相色譜分離，通常需要添加離子對(duì)試劑。這些試劑通常是強(qiáng)酸和強(qiáng)堿，如鹽酸、氫氧化鈉、磷酸等，可以與樣品中的堿性化合物形成穩(wěn)定的離子對(duì)。然而，添加離子對(duì)試劑時(shí)，需要考慮流動(dòng)相的pH值對(duì)離子對(duì)形成的影響。

通常情況下，離子對(duì)試劑的pH值應(yīng)該控制在2.5-3.5之間，以確保流動(dòng)相中的試劑處于離子對(duì)形成的最佳pH值。這是因?yàn)椋?dāng)流動(dòng)相的pH值較低時(shí)，離子對(duì)試劑可以形成穩(wěn)定的陽離子，可以與樣品中的陰離子形成離子對(duì)。如果流動(dòng)相的pH值過高，試劑會(huì)呈現(xiàn)穩(wěn)定的陰離子狀態(tài)，會(huì)與樣品中的陽離子形成離子對(duì)。但是，這種反應(yīng)的效率較低，從而影響樣品的分離和檢測。

另外，pH值的選擇還應(yīng)該考慮到樣品的性質(zhì)。例如，如果分離的樣品是一種弱堿性物質(zhì)，那么流動(dòng)相的pH值應(yīng)該控制在較高的范圍內(nèi)（例如4.5-5.5），以確保樣品分子處于帶正電荷的離子化狀態(tài)。