在反相色譜中,化合物的極性大小對(duì)出峰順序有較大影響。一般情況下,極性較小的化合物會(huì)先被洗脫出來(lái),而極性較大的化合物則停留時(shí)間較長(zhǎng),后被洗脫。具體來(lái)說(shuō),以下是一般情況下極性大小出峰順序的規(guī)律:1. 非極性化合物:這些化合物與反相柱的填料相互作用較弱,因此在反相色譜中停留時(shí)間較短,先被洗脫出來(lái)。2. 低極性化合物:這些化合物具有一定的極性,與反相柱的填料相互作用較強(qiáng),但仍相對(duì)較小,停留時(shí)間較長(zhǎng),稍后被
2023/07 Vink
在反相柱上分離化合物時(shí),一般的洗脫順序是從極性物質(zhì)向非極性物質(zhì)逐漸增加。這是因?yàn)榉聪嘀奶盍贤ǔJ鞘杷缘模c溶劑中的水相互作用較差,因此溶于水中的極性化合物在柱上停留時(shí)間較長(zhǎng),洗脫順序會(huì)受到他們的極性程度的影響。下面是常見(jiàn)的洗脫順序:1. 非極性化合物:這些化合物不與填料具有明顯相互作用,所以在反相柱上停留時(shí)間較短,一般會(huì)在初始的洗脫階段被洗脫出來(lái)。2. 中極性化合物:這些化合物具有一定的極性,
2023/07 Vink
高效液相色譜柱的柱效參數(shù)(Column Efficiency Parameters)是衡量柱子分離性能和效率的重要指標(biāo)。以下是常見(jiàn)的柱效參數(shù):1. 理論板數(shù)(Theoretical Plates):理論板數(shù)是衡量柱子分離效果和分離程度的一個(gè)重要參數(shù)。它表示在理想情況下,一組理論板(效率相等的連續(xù)分離階段)能夠?qū)崿F(xiàn)的柱效。一般用N表示,計(jì)算公式為N = 16 * (tr / W) ^ 2,其中tr為
2023/07 Vink
反相高效液相色譜柱(reversed-phase HPLC column)是一種常用的HPLC柱,用于分離非極性或中極性化合物。反相柱是HPLC分析中應(yīng)用最廣泛的柱類(lèi)型之一。反相柱的填料通常是由一種具有親水性的羧酸類(lèi)吸附劑(如C18、C8等)涂覆在硅膠或者親水性載體上構(gòu)成。這種親水層在分析過(guò)程中形成“水膜”,而非極性或中極性溶質(zhì)在該層上不易被吸附,從而實(shí)現(xiàn)了溶質(zhì)的分離。反相柱對(duì)于非極性或中極性化合
2023/07 Vink
液相柱體積計(jì)算公式液相柱的體積可以通過(guò)以下公式計(jì)算:體積(V) = π * r2 * L其中,V 是液相柱的體積(單位為 mL 或 cm3);π 是圓周率,約為3.14;r 是液相柱的半徑(單位為 cm);L 是液相柱的長(zhǎng)度(單位為 cm)。注:在實(shí)際計(jì)算中,常常使用直徑(D)而非半徑(r)表示液相柱的尺寸。可以使用以下公式將直徑轉(zhuǎn)換為半徑:r = D / 2所以,液相柱的體積(V)也可以用以下公
2023/07 Vink
液相柱子接反了會(huì)怎么樣?當(dāng)液相柱連接反向時(shí),可能會(huì)發(fā)生以下情況:1. 低分辨率:液相柱的方向是設(shè)計(jì)用于保證最佳分離效果的,如果接反了,可能會(huì)降低柱子的分辨率。分離效果不佳會(huì)導(dǎo)致樣品無(wú)法準(zhǔn)確分離和定量。2. 壓力升高:連接反向可能會(huì)導(dǎo)致液相流動(dòng)阻力增加,導(dǎo)致系統(tǒng)中的壓力升高。這可能會(huì)對(duì)液相色譜系統(tǒng)的運(yùn)行穩(wěn)定性產(chǎn)生影響,并增加泄漏和其他問(wèn)題的風(fēng)險(xiǎn)。3. 柱損壞:一些液相柱具有方向性,如果接反,可能會(huì)導(dǎo)
2023/07 Vink
液相柱子堵了要怎么沖?當(dāng)液相柱堵塞時(shí),可以嘗試以下幾種方法來(lái)進(jìn)行沖洗和恢復(fù):1. 反向沖洗:將液相柱反向連接到系統(tǒng)中,并通過(guò)反向流動(dòng)來(lái)沖洗液相柱。這可以通過(guò)倒置液相柱并連接到洗脫液的輸入端來(lái)實(shí)現(xiàn)。流動(dòng)的反向沖洗液可以幫助清除堵塞物,但要注意沖洗液的選擇以避免損壞柱子。2. 使用溶解堵塞物的溶液:根據(jù)可能的堵塞物,選擇相應(yīng)的溶液來(lái)溶解堵塞物。這可以根據(jù)前期的運(yùn)行狀況和樣品特性進(jìn)行選擇。注入溶解堵塞物
2023/07 Vink
液相柱塞桿怎么清洗?液相柱塞桿(piston rod)是液相色譜系統(tǒng)中的一個(gè)關(guān)鍵部件,通常用于移動(dòng)液相柱和控制液相流動(dòng)。由于其與樣品溶液接觸,很容易受到污染或粘附,需要定期清洗以確保系統(tǒng)的正常運(yùn)行。以下是液相柱塞桿清洗的一般步驟:1. 分離:首先,將液相柱從色譜系統(tǒng)中拆卸下來(lái),以便單獨(dú)處理液相柱塞桿。2. 擦拭:使用無(wú)纖維、無(wú)塵的柔軟布或特殊紙巾,輕輕擦拭液相柱塞桿的表面。注意不要用力過(guò)大,以避免
2023/07 Vink